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Robin Tunney naît le 19 Juin 1972 à Chicago dans l'Illinois (États-Unis).

Dès son plus jeune âge, la jeune femme s'intéresse à la comédie. Elle intègre alors la Chicago Academy for the Performing Arts. La comédienne en herbe s'envole ensuite vers Hollywood afin de pouvoir vivre de sa passion.

Elle débute à l'âge de 15 ans pour la télévision dans le téléfilm Frog, rôle qu'elle reprendra d'ailleurs quatre ans plus tard. L'actrice doit attendre 1995 pour se faire remarquer grâce à son rôle dans Empire Records. Elle enchaîne alors les comédies dont Julian Po en 1997 avec Christian Slater puis La fin des temps en 1999 avec l'impressionnant Arnold Schwarzenegger. Elle joue ensuite dans Verticale Limit en 2000. Après un rôle en guest-star dans le pilote de la série Dr House en 2004, la jeune femme décroche le rôle de sa vie dans la série à succès Prison Break aux côtés de Dominic Purcell et Wentworth Miller. En 2007, elle est à l'affiche du thriller Hollywoodland avec Adrien Brody et Ben Affleck.